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技術(shù)文章

Technical articles

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  • 20179-28
    實(shí)驗(yàn)助手——質(zhì)粒圖譜如何“瞅”

    每當(dāng)拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜,是不是一下就有點(diǎn)懵了?這些ori、RBS、tet是什么?這些箭頭代表什么,轉(zhuǎn)錄的方向嗎?不要著急,申知心生物把這些告訴你,也許會(huì)解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個(gè)有用的基因(目的基因——研究或應(yīng)用基因)通過(guò)基因工程手段送到生物細(xì)胞(受體細(xì)胞),需要運(yùn)載工具(交通工具)攜帶外源基因進(jìn)...

  • 20179-26
    實(shí)驗(yàn)助手—六大要素讓你告別RNA反轉(zhuǎn)錄失敗

    RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類:oligodT,隨機(jī)引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應(yīng)用范圍更加廣泛,是因?yàn)榭捎纱双@得mRNA的全長(zhǎng)拷貝。然而如果mRNA長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)4kb,或者沒(méi)有polyA尾(原核mRNA或rRNA),就需要考慮使用隨機(jī)引物進(jìn)行RNA的反轉(zhuǎn)錄。隨機(jī)引物雖能長(zhǎng)基因的5’末端的轉(zhuǎn)錄,但并不能獲得整個(gè)基因全長(zhǎng)的cDNAs,且對(duì)RNA樣品質(zhì)量要求比較高,此時(shí)可用6-8個(gè)核酸聚合體來(lái)提高cDNAs的合成量。而對(duì)于真核生物的qPCR...

  • 20179-21
    解析幾個(gè)常見(jiàn)Elisa試劑盒使用過(guò)程中的困惑

    對(duì)于Elisa試劑盒的使用,總有解不完的疑問(wèn),比如說(shuō)加樣器不確;特別10ul以下的加樣器,對(duì)成果影響;保溫設(shè)備不良;洗刷用水不規(guī)范。如何解決這些疑問(wèn)呢:1、加樣不;沒(méi)有混勻。加樣時(shí)必定要細(xì)心。加樣后,再查看,以防漏加、錯(cuò)加。2、加樣后,重復(fù)抽吸3次混勻,防止血清集合孔底,致使非特異性吸附。洗刷洗刷不①每次灌水洗刷,應(yīng)停止30秒鐘;②選用吸水紙作為襯墊,每次洗刷后扣干孔內(nèi)水分;3、可選用塑料洗刷瓶。加酶反響漏加滴加后,細(xì)心查看各孔成果判別①包含陰性對(duì)照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;...

  • 20179-21
    科研有六重境界,你到第幾重了?

    臨淵羨魚(yú)階組里的前輩們看起來(lái)個(gè)個(gè)都是牛人,各有各的事業(yè),可是喂~誰(shuí)來(lái)提挈小生則個(gè)!導(dǎo)師:“在咱們這個(gè)組的大框架下自己找個(gè)坑填上去~”——坑在哪?師姐:“問(wèn)我問(wèn)題之前不能先自己查一下嘛?你這個(gè)問(wèn)題明明有現(xiàn)成答案呀~”——上哪查師兄:“去去去,小孩子一邊看文獻(xiàn)去!”——看不懂~_看什么文獻(xiàn),怎么看?專業(yè)術(shù)語(yǔ)不懂怎么辦?好吧,大不了啃字典,先把組里發(fā)過(guò)的文章都過(guò)一遍好了。終于有一天組會(huì)討論時(shí),哇我居然聽(tīng)懂了躍躍欲試階已經(jīng)能相當(dāng)熟練地在知網(wǎng)、NCBI等數(shù)據(jù)庫(kù)上查到自己想要的信息了,儀...

  • 20179-18
    內(nèi)外科大夫那些有趣的區(qū)別

    雖然說(shuō)內(nèi)科和外科都是相親相愛(ài)的一家人,但是細(xì)數(shù)一下,兩者之間還是有一些有趣的差別,看看網(wǎng)友們是如何總結(jié)的。區(qū)別一:內(nèi)科大夫多話癆皇上:此番遼國(guó)起傾國(guó)之力,那蕭皇后親率三十萬(wàn)大軍南下,諸位愛(ài)卿如何是好??jī)?nèi)科大臣:啟稟皇上,臣以為還當(dāng)細(xì)細(xì)打探方能定奪,不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征,還是南院大王統(tǒng)帥?又或者是其他將領(lǐng)?這分型應(yīng)當(dāng)明確。三十萬(wàn)兵力應(yīng)當(dāng)有所鑒別,據(jù)臣所知遼國(guó)連續(xù)三年大旱,北方更有金人犯境,能聚三十萬(wàn)兵力實(shí)在存疑,打個(gè)問(wèn)號(hào)。遼國(guó)大軍南下,是分兵幾路?每路兵馬幾何?還需完...

  • 20179-12
    Western blot,內(nèi)參蛋白選用技巧!

    一、WesternBlot實(shí)驗(yàn)為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達(dá)量的相對(duì)多少,前提條件是等量的組織細(xì)胞蛋白上樣,才有比較的基礎(chǔ),特別是表達(dá)量不高時(shí),上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此,在WesternBlot試驗(yàn)中,進(jìn)行內(nèi)參的檢測(cè),有以下兩點(diǎn)作用:1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過(guò)程中存在的誤差,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;2、使用內(nèi)參可以作為空白對(duì)照,檢測(cè)蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個(gè)WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)...

  • 20179-12
    ELISA免疫測(cè)定,實(shí)驗(yàn)技巧!!

    ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。在臨床檢驗(yàn)中主要通過(guò)抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)體液中的抗體或抗原性物質(zhì)。ELISA免疫測(cè)定目的是?1.測(cè)定體液中的各種蛋白質(zhì),包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等;2.測(cè)定激素,包括小分子量的甾體激素等;3.測(cè)定抗生素和藥物;4.測(cè)定病原體...

  • 20179-12
    ELISA試劑盒維護(hù)保養(yǎng)內(nèi)容

    ELISA試劑盒方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型肝炎病毒,適用于大批量發(fā)病樣本的檢測(cè),可用于豬戊肝的快速診斷,并預(yù)防、控制豬戊肝的流行和阻斷戊肝由豬向人傳播。光用不保養(yǎng)可不行,ELISA試劑盒儀器的一般性保護(hù)的主要內(nèi)容,ELISA試劑盒加外一切儀器在關(guān)機(jī)停用時(shí),要關(guān)斷總機(jī)電源,并拔下電源插頭,以安全。ELISA試劑盒試驗(yàn)儀器保養(yǎng):儀器的接地:接地的疑問(wèn)除對(duì)儀器的性能、牢靠性有影響外,還對(duì)使用者的人身安全關(guān)系...

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